雙縮脲試劑優(yōu)缺點

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雙縮脲試劑是需要其中的銅離子與肽鍵反應,本來這種物質(zhì)是用來鑒定雙縮脲的,因為雙縮脲和蛋白質(zhì)都具有肽鍵所以也可以用來鑒定蛋白質(zhì),那么雙縮脲試劑優(yōu)缺點有哪些呢?下面就一起隨小編來了解一下吧。

雙縮脲(NH3CONHCONH3)是兩個分子脲經(jīng)180℃左右加熱,放出一個分子氨后得到的產(chǎn)物,在強堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物,雙縮脲反應產(chǎn)生的紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比,而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關(guān),故可用來測定蛋白質(zhì)含量。

雙縮脲試劑的優(yōu)點

雙縮脲法測定蛋白質(zhì)測定范圍能夠是1~10mg蛋白質(zhì),操作簡單、快捷。既適合手工操作,又適合自動化分析,重復性好、線性關(guān)系好, 雙縮脲試劑可以長期保存( 若貯存瓶中有黑色沉淀出現(xiàn),則需要重新配制)。

雙縮脲試劑的缺點

靈敏度差,測定范圍窄,樣品需要量大,不同的蛋白質(zhì)產(chǎn)生顏色的深淺相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精確的蛋白質(zhì)測定。 干擾測定的物質(zhì)包括有:在性質(zhì)上是氨基酸或肽的緩沖液,如TrIs緩沖液,因為它們產(chǎn)生陽性呈色反應,銅離子也容易被還原,有時出現(xiàn)紅色沉淀。

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